不要再犯!10個(gè)讓液相色譜儀流動(dòng)相失效的壞習(xí)慣!
大家在液相色譜儀流動(dòng)相使用過程中除了有所為,還要有所不為,那有哪些習(xí)慣是需要避免的呢?
1、參加有機(jī)相之后再丈量活動(dòng)相的PH值
通常情況下丈量活動(dòng)相的PH值,是丈量水相中的PH值參數(shù)。有機(jī)相參加之后PH值參數(shù)的丈量就和之前有誤差。
PS:但假如能確保每次丈量都是參加相同量的有機(jī)相之后得到的PH值,雖然這不能確保精確度,可是這能確保前后一致的丈量結(jié)果,所以這樣也沒有問題。
2、不運(yùn)用緩沖鹽
緩沖鹽的參加是用來操控和批改活動(dòng)相中PH值的改動(dòng)的。樣品基質(zhì)、空氣中的CO2、水中的雜質(zhì)都會(huì)形成活動(dòng)相PH值的改動(dòng),而PH值的改動(dòng)會(huì)影響樣品的保存、峰形、峰面積參數(shù)。
3、沒有在正確的緩沖區(qū)間運(yùn)用緩沖鹽
每個(gè)緩沖鹽都有必定的緩沖范圍,在此范圍內(nèi)它供給了最佳的pH穩(wěn)定性。在這個(gè)范圍外,緩沖鹽在抵抗pH值變化方面是無效的。所以要么在正確的范圍內(nèi)運(yùn)用緩沖鹽,要么選擇一個(gè)緩沖范圍覆蓋所需pH值的緩沖鹽。
4、向有機(jī)相中參加緩沖鹽
假如將水相的緩沖溶液參加到有機(jī)相中,會(huì)大大添加緩沖鹽分出的危險(xiǎn)。緩沖鹽的分出在初期或許并不明顯,但會(huì)對(duì)儀器的各個(gè)部件都會(huì)產(chǎn)生必定影響。(延伸閱讀:做完樣品記得移除體系中的緩沖鹽哦!)
5、梯度洗脫時(shí)直接用泵去混合活動(dòng)相而且活動(dòng)相份額從0%開端
現(xiàn)在的液相色譜能夠十分高效的進(jìn)行在線脫氣和活動(dòng)相混合。可是將梯度洗脫份額從0%開端,會(huì)有比較大的呈現(xiàn)氣泡和沉積的危險(xiǎn)。(延伸閱讀:深度剖析等度洗脫和梯度洗脫的適用范圍和辦法設(shè)置)
6、沒有運(yùn)用正確的pH值潤飾酸或堿作為緩沖液
緩沖溶液的潤飾酸或堿,只運(yùn)用生成緩沖鹽的酸或堿。例如,磷酸鈉緩沖液只能用磷酸或氫氧化鈉調(diào)理。
7、沒有在辦法中闡明緩沖液的全部信息
例如只在辦法中寫“稱5克磷酸鈉溶入1000毫升水”。緩沖鹽的類型決議其pH緩沖范圍,而緩沖鹽中所需物質(zhì)的濃度決議了緩沖強(qiáng)度。例如:5g的無水磷酸鈉和5g的一水磷酸鈉具有不同的緩沖強(qiáng)度,會(huì)影響保存率。
8、運(yùn)用儀器時(shí)不調(diào)查之前運(yùn)用的活動(dòng)相情況,直接用純有機(jī)溶劑沖體系
假如之前的辦法在B通道運(yùn)用緩沖溶液,而這次沒有經(jīng)過調(diào)查就直接在B通道運(yùn)用了純的有機(jī)溶劑,那么就會(huì)形成該通道緩沖鹽分出、呈現(xiàn)阻塞等危險(xiǎn)。
9、將溶劑瓶中的活動(dòng)相用干為止
溶劑瓶中的活動(dòng)相假如用干,會(huì)導(dǎo)致儀器中呈現(xiàn)氣泡等問題。
10、僅運(yùn)用超聲來給活動(dòng)相脫氣
超聲脫氣有必定的脫氣作用,但徹底脫氣的效果并不理想。所以在此建議運(yùn)用真空脫氣機(jī)進(jìn)行在線脫氣。
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