南京科捷丨挑戰:你敢來探究液相色譜流動相的奧妙嗎?
一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。
選好填料(固定相)后,強溶劑使溶質在填料表面的吸附減少,相應的容量因子k降低;而較弱的溶劑使溶質在填料表面吸附增加,相應的容量因子k升高。因此,k值是流動相組成的函數。塔板數N一般與流動相的粘度成反比。所以選擇流動相時應考慮以下幾個方面:
①流動相應不改變填料的任何性質。低交聯度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時遇到某些有機相會溶脹或收縮,從而改變色譜柱填床的性質。堿性流動相不能用于硅膠柱系統。酸性流動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統。
②純度。色譜柱的壽命與大量流動相通過有關,特別是當溶劑所含雜質在柱上積累時。
③必須與檢測器匹配。使用UV檢測器時,所用流動相在檢測波長下應沒有吸收,或吸收很小。當使用示差折光檢測器時,應選擇折光系數與樣品差別較大的溶劑作流動相,以提高靈敏度。
④粘度要低(應<2cp)。高粘度溶劑會影響溶質的擴散、傳質,降低柱效,還會使柱壓降增加,使分離時間延長。選擇沸點在100℃以下的流動相。
⑤對樣品的溶解度要適宜。如果溶解度欠佳,樣品會在柱頭沉淀,不但影響了純化分離,且會使柱子惡化。
⑥樣品易于回收。應選用揮發性溶劑。
LC600A 高效液相色譜儀
LC600A 高效智能全控液相色譜儀由 P600 高壓恒流泵與 UV600 紫外檢測器直接構成等度 / 梯度分析系統。使用 WS600 工作站可以同時控制數臺 P600 高壓恒流泵、UV600 紫外檢測器及恒溫柱箱等,實行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。
特點:
?LC-P600高壓恒流泵
(1)往復式并聯泵設計,流量精度高,壓力脈動小,延長密封圈和 活塞桿的使用壽命;
(2)隔膜式秒沖阻尼器與電子脈動抑制技術同時控制壓力脈動保障 最低的基線噪音;
(3)整體性單向閥,結構簡單,密封性好;
(4)柱塞桿自動縮進,方便更換密封圈;
(5)可選配注后清洗功能,適用于使用含緩沖鹽的分析條件。
?UV600紫外檢測器
(1)平行雙錐孔設計的流動池,大幅提高信噪比,檢測效果更佳;
(2)開機自檢功能,通過圖譜上486.6nm和656nm這二點的位置, 以判斷波長示值誤差的準確性,保證極優的波長精度,保障儀器最佳狀態;
(3)控制電路采用多微處理器結構,分別管理信號采集、數據處理、 系統控制和通信。在做等度分析時,可以方便的通過全漢字的液晶屏與七 個功能鍵,設置波長、濾波常數、輸出量程、運行時間等參數。并且可以 實現開關氘燈,光譜掃描,啟動分析程序等功能;
(4)全數字交換系統,避免了色譜信號需要多重模-數轉換帶來的 信號畸變與干擾。
?WS600色譜工作站
(1)具有液相色譜系統控制和色譜數據處理雙重功能;
(2)六種定量計算方法;
(3)多重不同濃度的標準試樣校準運行,建立樣品濃度-面積校正曲線;
(4)靈活的峰識別和處理能力;
(5)色譜圖形、定量計算方式、峰處理參數及峰鑒定表等可保存到用戶自命名的文件中。
?具有自動在線檢測功能
液相色譜原理:儲液器中的流動相由高壓泵泵入系統,樣品溶液通過注射器進入流動相,流動相裝柱(固定相)。由于樣品溶液中的組分在兩相中的分配系數不同,當它們相對運動時,會經歷重復的時間。在吸附-解吸分配過程中,各組分的移動速度差異很大。它被分離成單一組分,依次流出色譜柱。當通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電信號并傳輸到記錄儀。這些數據可以用圖表的形式打印出來,供研究人員分析。